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偶氮甲酰胺(azodicarbonamide，ADA)是一種黃至橘紅色結(jié)晶性粉末，無(wú)臭，常用于小麥粉處理劑及焙烤食品快速發(fā)酵劑。作為面粉增筋劑，具有漂白和氧化雙重作用，在歐盟和澳大利亞，偶氮甲酰胺被禁止使用在食品工業(yè)，也有部分國(guó)家(包括中國(guó))是允許將其作為添加劑用在食品工業(yè)中的。我國(guó)GB2760《食品添加劑使用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》(含1997～2006年增補(bǔ)品種)規(guī)定小麥粉中ADA最大使用量為0.045g/kg近年來(lái)，有研究表明偶氮甲酰胺在面粉中可能代謝產(chǎn)生氨基脲(semicarbazide，SEM)[3]。SEM通常作為呋喃西林(nitrofurazone)的代謝物在獸藥殘留中檢出。硝基呋喃類(lèi)藥物具有致突變和致癌作用， 因此，面粉中偶氮甲酰胺的快速檢測(cè)方法的開(kāi)發(fā)顯得尤為重要。雖然我國(guó)已規(guī)定偶氮甲酰胺在面粉中的最大使用量，但目前還未見(jiàn)有關(guān)于面粉中ADA快速檢測(cè)方法的報(bào)道，也無(wú)相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是賽智科技利用LC-10Tvp高效液相色譜儀對(duì)偶氮甲酰胺進(jìn)行的HPLC檢測(cè)方案。

（本應(yīng)用方案請(qǐng)勿轉(zhuǎn)載，侵權(quán)必究）

1、儀器與試劑

1.1儀器、設(shè)備

LC-10Tvp高效液相色譜儀

Waters Spherisorb  CNRP：250mm×4.6mm×5μm

分析天平

氮吹儀

振蕩器

針頭過(guò)濾器

微孔濾膜：0.45μm

1.2試劑

丙酮（HPLC）

正己烷（HPLC）

乙酸銨（AR)

2、供試品溶液和對(duì)照品溶液的制備

對(duì)照品溶液的制備：取標(biāo)準(zhǔn)品適量，用流動(dòng)相稀釋成合適的濃度。

供試品溶液的制備：稱(chēng)取1g面粉至50ml離心管中，加入10ml丙酮溶液，振蕩20min，5000r/min離心5min，吸取提取液5ml至玻璃試管中，40℃水浴下氮?dú)獯蹈伞Ｓ?ml20mmol乙酸銨溶液溶解，渦旋混勻后用1ml正己烷萃取，靜置15min（有離心機(jī)條件下3000r/min離心5min）。下清液過(guò)0.45um濾膜，上機(jī)分析。

3、色譜條件

色譜柱：Waters Spherisorb  CNRP：250mm×4.6mm×5μm

流動(dòng)相：20mmol乙酸銨溶液

波長(zhǎng)：245nm

流速：0.65 mL/min

4、測(cè)定法

分別精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各5ul，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得

5、色譜圖

6、結(jié)論

本應(yīng)用方法采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，測(cè)得加標(biāo)回收率為83.1%。