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高效液相色譜儀流動(dòng)相的調(diào)整三原則
高效液相色譜儀分析開發(fā)中流動(dòng)相調(diào)整的三個(gè)原則是由強(qiáng)到弱、三倍規(guī)則和粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào)。
一、由強(qiáng)到弱:
一般先用90%的乙腈或甲醇-水或緩沖溶液進(jìn)行試驗(yàn),可很快得到分離結(jié)果,然后根據(jù)出峰情況調(diào)整有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的比例。
二、三倍規(guī)則:
每減少10%的有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)的量,保留因子增加約3倍,此為三倍規(guī)則。調(diào)整時(shí)注意觀察各個(gè)峰的分離情況。
三、粗調(diào)轉(zhuǎn)微調(diào):
當(dāng)分離達(dá)到一定程度時(shí),應(yīng)將有機(jī)溶劑(乙腈或甲醇)10%的改變量調(diào)整為5%,并據(jù)此規(guī)則逐漸降低調(diào)整率,直至各組分的分離情況不再改變。
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